方法  通过在培养基中添加不同浓度的Pluripotin，观察其对体外培养的兔角膜缘上皮细胞增殖能力的影响。收集原代或传代培养的兔角膜缘上皮细胞行MTT实验，β-半乳糖苷酶染色，细胞克隆形成分析以及相关标志的免疫荧光鉴定。

结果  通过MTT实验、细胞克隆形成分析，以及免疫细胞化学检测，发现与正常对照组相比，低浓度Pluripotin（≤400nM）能够促进原代培养的兔角膜缘上皮细胞的体外扩增。其表现为接种相同密度的细胞经过相同培养时间，实验组细胞生长更快、可获得细胞数量更多、细胞形态更加规则、均一；克隆形成率明显提高，其中，中等大小克隆（600-900μm）比例明显增加（高于60%，对照组为18.6%），小克隆数量减少至35.0%（对照组为79.5%）；更多细胞阳性表达干细胞相关标志如p63、ABCG2、Ki67。当Pluripotin浓度为800nM时，其促进细胞增殖的作用下降，同时显现出一定的细胞毒性。此外，对传代培养的兔角膜缘上皮细胞行衰老染色，结果显示，Pluripotin能够延缓体外传代引发的角膜缘上皮细胞的衰老过程。

结论  Pluripotin提高了体外培养的兔角膜缘上皮干/祖细胞的活性，提高其增殖能力，同时延缓细胞衰老，为再生医学种子细胞的短期体外大量扩增提供了新的方法。