目的:病理切片(石蜡切片和冰冻切片)与高分辨率OCT在研究大鼠视网膜时各自的特点及视网膜各层厚度的定量比较。 方法:正常BN大鼠6只共12眼,先用HD-OCT对大鼠视网膜各层进行测量,然后处死大鼠,左眼制作视网膜石蜡切片,右眼制作视网膜冰冻切片。所有病理切片经HE 染色,在200倍光镜下采图后应用IIP软件测量距视盘2PD处视网膜各层厚度,对所得实验数据进行统计学分析,比较病理切片与HD-OCT中视网膜各层厚度的改变。 结果:石蜡切片视网膜全层厚约173.02μm,冰冻切片视网膜全层厚约217.72μm,OCT视网膜全层厚约216.75μm。BN大鼠视网膜神经纤维层和节细胞层之间不易分辨,所以两层共同分析。RPE层太薄,测量误差较大,所以在此不作分析。经统计学分析,除内丛状层三种方法没有明显差异外,其余各层石蜡切片和冰冻切片以及OCT均有显著差异(P<0.05),而冰冻切片和OCT之间无显著差异。 神经纤维-节细胞层、内丛状层、内核层、外丛状层、外核层、感光细胞层平均值(μm)在石蜡切片为:18.10、41.71、31.52、13.10、38.80、23.78;在冰冻切片为21.84、45.43、27.00、 14.23、53.05、49.63;在OCT上为22.25、44.75、23.50、17.25 、57.35、44.50 。以上各层分别占视网膜全层厚度的百分比(%)在石蜡切片为10.64、24.11、18.22、7.57、22.43、13.74;在冰冻切片为10.03、20.87、12.40、6.54、24.37、22.80;在OCT为10.27、20.65、10.84、7.96、26.53、20.53。 结论:在制作石蜡切片过程中,存在脱水、浸腊等步骤,使视网膜变薄(P<0.05),但由于视网膜各层成分不同,对其反应也各不相同,使视网膜各层呈非线性收缩的现象。石蜡切片中,神经纤维-节细胞层、外丛状层、外核层、感光细胞层均发生不同程度收缩(P<0.05),以感光细胞层收缩的比例最大,而神经纤维-节细胞层收缩不明显(P>0.05),内核层不仅未发生收缩,甚至变厚(P<0.05),可能是由于细胞肿胀所致。冰冻切片相对更为接近HD-OCT测量的结果。HD-OCT在观察大鼠视网膜方面存在明显的优势。
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