目的 探讨树突状细胞在角膜移植术后免疫反应中的作用,探索角膜移植术后排斥反应的启动机制,寻找更有效地防治排斥反应方法。 方法 建立同种异体角膜移植的大鼠模型,以自体角膜移植和同种异体角膜移植激素抗排斥的大鼠模型为对照,术后通过裂隙灯观察大鼠角膜的变化情况,进行排斥反应指数评分,分别于术后5天、7天和9天取材,进行组织病理学检查,RT-PCR检测大鼠树突状细胞特异性标志Integrin αEmRNA的表达,免疫组化检测Integrin αE在角膜的表达,免疫荧光、共聚焦检测Integrin αE在角膜的细胞定位。 结果 正常角膜组织和三个手术干预组角膜均可见Integrin αE mRNA表达;同种异体角膜移植组术后9天的Integrin αE mRNA的表达显著高于其他两组(P<0.05)。免疫组化及免疫荧光检测正常角膜各层均可见Integrin αE蛋白表达,Integrin αE主要表达在细胞浆。移植术后各组角膜各层均可见Integrin αE蛋白表达,术后9天同种异体角膜移植组角膜上皮细胞Integrin αE的细胞膜表达增强,同种异体角膜移植组角膜基质层Integrin αE阳性细胞明显增多。自体移植组和同种异体角膜移植激素抗排斥组角膜基质层Integrin αE阳性细胞轻度增多。 结论 正常角膜上皮层、基质层和内皮细胞层存在表达树突状细胞特异性标志Integrin αE的细胞,这些细胞可能具有免疫监视的功能。角膜移植术后9天Integrin αE mRNA表达显著性增加,角膜上皮细胞出现Integrin αE蛋白分子由细胞浆表达向细胞膜表达增强,基质层Integrin αE阳性的细胞显著增多,提示角膜树突状细胞参与了同种异体角膜移植术后的免疫排斥过程,且移植前刮除角膜上皮并不能减轻术后排斥反应。 |