目的 首先建立糖尿病大鼠动物模型,观察不同时期大鼠视网膜中血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况,然后体外培养兔视网膜Müller细胞,通过改变细胞培养液中葡萄糖的浓度观察浓度变化对血管内皮细胞生长因子表达的影响,以探讨糖尿病视网膜病变(DR)时Müller的VEGF 的表达。方法 建立链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠动物模型,利用免疫组织化学的方法,检测STZ大鼠视网膜不同组、不同时期VEGF蛋白质的表达情况,同时用电镜观察不同时期血管的超微结构;体外培养兔视网膜Müller细胞,采用免疫组化和ELISA的方法,测定不同浓度葡萄糖条件Müller细胞VEGF蛋白质的表达情况。结果 STZ大鼠动物模型中结果如下:糖尿病3个月组(M3组)在内核层及节细胞层有VEGF蛋白质阳性表达(34%),糖尿病5个月组(M5组)在内核层、节细胞层及血管上可见VEGF蛋白质强阳性表达(89%)。透射电镜观察从糖尿病1个月组(M1组)开始大鼠视网膜血管基底膜等出现异常改变,以M5最明显。兔视网膜Müller中结果如下:随着葡萄糖浓度的增加,VEGF蛋白表达逐渐增强, 3d时表达达到高峰,6d时下降(p<0.01)。ELISA结果定量显示高糖环境下VEGF蛋白分泌量3d时最高,6d时下降(p<0.01)。结论 STZ大鼠视网膜的Müller细胞可以表达VEGF,而高浓度葡萄糖可以促进Müller细胞表达VEGF。 |