目的 研究藏红花素（crocin）对大鼠缺血再灌注视网膜神经节细胞（RGCs）的保护作用及其相关分子机制。
方法 72只雄性SD大鼠随机分为4组：假手术组，缺血再灌注损伤组，crocin治疗组，抑制剂（LY294002）组。大鼠左眼经前房穿刺灌注形成150mmHg 的眼压维持60min，右眼为假手术组。灌注前30min腹腔注射crocin (50mg/kg)。通过TUNEL染色及荧光金逆行染色观察视网膜缺血再灌注后及应用crocin后RGCs凋亡细胞及存活细胞数目变化。应用Western blot法及免疫组化法分析Akt, BAX, Bcl-2的表达。最后玻璃体腔注射LY294002抑制Akt表达后观察缺血再灌注后RGCs凋亡细胞及存活细胞数目变化。
结果 TUNEL染色结果显示缺血后第1天，缺血再灌注损伤组RGCs凋亡率为58%，crocin治疗组为33%（P<0.01）。荧光金逆行染色结果显示缺血后第14天，缺血再灌注损伤组RGCs数目1004±44/mm2，crocin治疗组1572±36/mm2（P<0.001）。Western blot结果显示缺血后第1天,crocin治疗组较缺血再灌注损伤组相比p-Akt表达升高2倍（P<0.01），Bcl-2/BAX升高1.5倍（P<0.05）。免疫组化染色结果显示p-Akt主要表达部位是在视网膜神经节细胞层。应用LY294002后，RGCs凋亡率较crocin治疗组升高20%（P<0.05），RGCs数目1126±40/mm2（P<0.01）。
结论 藏红花素通过增加p-Akt的表达，发挥对缺血再灌注视网膜RGCs的保护作用。 |
