目的 探讨以APCM为支架体外构建含有角膜内皮细胞和基质细胞的组织工程兔角膜后板层的可行性。
方法 0.5%SDS洗脱新鲜猪角膜制备全层APCM，解剖显微镜下剖切全层APCM获取厚约１mm、直径7mm后板层APCM支架，利用1ml胰岛素针将1ml浓度为5×10⁵个/ml、3代培养的兔角膜基质细胞悬液注入支架内,振摇培养21d，将1代培养的兔角膜内皮细胞以5×10³个/mm²接种于后板层APCM的后弹力层表面，静置培养7d。分别于培养3d、7d、14d、21d、28d取材行HE染色，观察构建物内细胞生长、分布及胶原纤维排列情况；取培养28d构建物行免疫组织化学染色检测基质细胞特异性标志物Vimentin、内皮细胞相关标志物NSE的表达。
结果 肉眼观察构建物透明度随培养时间延长逐渐提高。培养3d、7d、14d、21d、28d取材行HE染色示，构建物内细胞密度逐渐增大，分布渐均匀，后弹力层表面逐渐形成连接紧密的单层细胞结构，构建物内胶原纤维排列规则、间隙逐渐变小。培养28d取材行免疫组化检查，构建物基质内细胞表达基质细胞标记物Vimentin，细胞密度大、分布均匀；后弹力层表面紧密连接的单层细胞表达内皮细胞标志物NSE。
结论 APCM可用于组织工程兔角膜后板层的体外构建，构建物表型类似正常兔角膜，为进一步以此构建物为供体实施内皮移植体内验证其功能以及将来组织工程人角膜构建奠定了实验基础。