目的 探讨牛膝多肽（ABPP）对谷氨酸诱导的视网膜神经节细胞损伤的保护作用及机制。
方法 星形孢菌素（SS）诱导RGC-5细胞分化，免疫荧光染色检测视网膜神经节细胞（RGCs）特异性蛋白Thy-1的表达量作为成功分化的标志。实验设对照组、谷氨酸组和不同剂量ABPP+谷氨酸组（ABPP，0.05、0.5、5.0µg/ml）。MTT法测定处理后细胞存活率；AnnexinV/PI双染色法定量观察细胞凋亡率；Fluo4/AM测定细胞内钙离子内流；TBARS定量分析法测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛（MDA）含量；流式细胞术测定细胞内活性氧自由基（ROS）和线粒体膜电位水平；蛋白免疫印迹法测定活化caspase-3及磷酸化MAPK相关蛋白水平。
结果 （1）SS能够诱导RGC-5细胞分化，表现为RGCs特异性蛋白Thy-1表达量上升和细胞形态趋于神经元样。（2）与谷氨酸组比较，0.5µg/ml ABPP可有效提高RGC-5细胞存活率，减少细胞凋亡。（3）ABPP能抑制钙离子内流、减少ROS及MDA产生、提高线粒体膜电位。（4）ABPP能部分抑制caspase-3及p38 MAPK蛋白活化。
结论 ABPP可抑制谷氨酸诱导的视网膜神经节细胞凋亡，其保护机制可能与抑制钙离子内流，从而进一步抑制由钙离子内流引起的细胞脂质过氧化，提高线粒体膜电位有关，并与p38 MAPK通路有一定联系。 |
