目的 探讨在体外条件下诱导UC-MSCs分化为角膜上皮细胞的可行性。 方法 消化法分离培养UC-MSCs细胞,流式细胞技术检测细胞表型、细胞周期,MTT 检测细胞生长增殖能力。将UC-MSCs在不同浓度的EGF(5ng/ml 、10ng/ml、15ng/ml)下培养,观察EGF能否诱导UC-MSCs分化为角膜上皮细胞。确定细胞分化的最佳时间。同时,将UC-MSCs与兔角膜上皮细胞共培养,观察分化情况,免疫组化检测角膜上皮相关蛋白的表达。 结果 采用消化法可以在体外条件下成功地分离培养UC-MSCs,其表达CD29、CD34,细胞保持着较旺盛的增殖能力。在15ng/ml EGF 处理30天的条件下,UC-MSCs可以部分表达角膜上皮细胞的标记K3;UC-MSCs在与角膜上皮细胞共培养2周后,UC-MSCs细胞可以检测到K3、ABCG2与P63的部分表达。 结论 体外条件下,采用共培养的方法可以诱导UC-MSCs 分化为角膜上皮细胞。 |