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高糖条件下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和糖尿病鼠视网膜内MicroRNAs的表达变化
作者:张红  文章来源:哈尔滨医科大学  点击数460  更新时间:2012/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的  分析高糖条件下HUVEC和糖尿病鼠视网膜中microRNAs及其调控生长因子的表达变化。

方法  HUVEC分为两组,对照组和实验组,对照组应用正常培养基培养;高糖组在正常培养基中加入25mmol/L葡萄糖培养。分别在30min,1h,3h,6h,12h,24h,48h 收集细胞,应用q RT-PCR对实验组和对照组microRNA-126VEGF进行检测。昆明小鼠随机分成实验组和对照组。实验组腹腔注射链脲佐菌素(StreptozocinSTZ)形成1型糖尿病模型,72小时后采尾血检测随机血糖,≥16.7mmol/l即为实验组建模成功。对照组腹腔注射柠檬酸缓冲液。每周测量实验各组小鼠体质量和血糖1次。在成模后8周应用q RT-PCR对视网膜microRNA-126VEGF进行检测。

结果  在高糖培养条件下,HUVECVEGF表达升高,随时间变化呈逐渐上升趋势;而microRNA-126变化呈相反趋势。与对照组相比,VEGF表达在30min,1h,3h,6h,12h,24h 48h后分别升高24%p0.05)、28%p0.05)、40%(p0.05)、44%p0.01)、53%p0.01)、 57%p0.005)和62%p0.005)。而microRNA-126的表达与对照组相比则分别下降41%(p0.25)34%p0.05)、23%p0.1)、37%p0.01)、46%p0.05)、56%p0.05)和73%p0.025)。糖尿病鼠STZ腹腔注射至8周时,糖尿病组平均血糖24.81±4.86mmol/l,正常组平均血糖6.47±0.6mmol/l。二者之间差异显著,具有统计学意义(t=12.594p0.001)。期间,糖尿病组血糖均>16.7mmol/l,正常组保持在5.6-7.4mmol/lq RT- PCR结果显示, 与对照组相比,microRNA-126在糖尿病鼠表达降低86%,VEGF表达升高40%

结论  在高糖培养HUVEC和糖尿病鼠视网膜中VEGF表达升高而microRNA-126表达降低,这一结果提示我们microRNA-126在糖尿病视网膜病变发展中起调控作用。

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