目的 观察氯化锂(Licl)对体外培养人眼Tenon囊成纤维细胞(human Tenon’s capsule fibroblasts, HTFs)的生长抑制效应并探讨其作用机制。 方法 SRB法、BRDU法检测细胞生长抑制率;采用流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡的变化;Hoechst33258染色后荧光显微镜观察细胞形态学的改变;采用细胞划痕染料标记示踪技术,以标记偶联指数评价缝隙连接通讯的指标,观察氯化锂对HTFs间GJIC的影响;氯化锂作用HTFs 48小时后,免疫荧光、western blotting及real-timePCR技术检测人眼Tenon囊成纤维细胞的CX43及CX43mRNA的表达。 结果 SRB法及BrdU显示,在40-320μmol/L范围内,氯化锂能够抑制HTFs的增殖,且呈剂量与时间依赖性。流式细胞术及Hoechst33258染色显示,氯化锂诱导HTFs凋亡,高浓度组尤为明显。细胞划痕染料标记示踪技术、免疫荧光、western blotting及real-timePCR技术显示,氯化锂可显著提高人Tenon囊成纤维细胞间GJIC功能,上调CX43及CX43mRNA的表达。 结论 氯化锂能抑制HTFs增殖,其机制为上调CX43及CX43mRNA的表达,提高人Tenon囊成纤维细胞间GJIC功能,诱导细胞凋亡。 |