目的 建立视网膜母细胞瘤鸡胚绒毛尿囊膜模型，确定肿瘤细胞接种条件；观察视网膜母细胞瘤SO -RB50瘤细胞诱导鸡胚绒毛尿囊膜新生血管变化，志在探讨瘤细胞诱导新生血管的机理。
方法 鸡胚孵化，制作孵化7天、8天、9天及10天的鸡胚CAM模型，接种1×106、2×106、4×106、6×106、9×106个SO-RB50瘤细胞，以PBS组为空白对照组，持续观察5-6天，大体拍照，取肿瘤组织切片，HE和免疫组织化学染色，光学显微镜下观察。荧光定量RT-PCR检测组织中人血管相关因子VEGFA、HIF-1α、TGFβ1及FGF-2 mRNA表达情况。
结果 孵化8天的鸡胚CAM接种6×106个瘤细胞后第3天可见肿瘤出现并逐渐增大，呈灰白的；肿瘤细胞浸润CAM，呈“巢样”生长，与人视网膜母细胞瘤肿瘤细胞形态相似，部分可见花环样结构。免疫组化CD56、NSE均阳性表达。接种数多组和接种数少组都有不同程度的新生血管生长，前者比后者新生血管出现的早，血管密度高；血管内皮VEGF阳性表达；RT-PCR检测到的血管因子主要是VEGF、FGF-2、TGFβ1和HIF-α1表达增加。
结论 视网膜母细胞瘤鸡胚绒毛尿囊膜肿瘤生长模型构建成功，瘤细胞形态学和生长特征与SO -RB50细胞株及人视网膜母细胞瘤肿瘤组织相似。SO -RB50细胞有明显的诱导新生血管的作用，主要与VEGF、FGF2等血管因子有关。 |
