目的 研究Muller细胞内色素上皮衍生因子(pigment epithelium derived factor,PEDF)与血管内皮生长因子(vascular endothelial factor,VEGF)的相互作用,为临床上治疗新生血管提供新的思路。 方法 大鼠Muller细胞原代培养,取第3代细胞用于实验。实验按以下操作进行:1.观察VEGF对PEDF的作用:VEGF处理组培养液中加入不同浓度VEGF(100nmol·L-1、500 nmol·L-1 、1000nmol·L-1、5000nmol·L-1),24h后收集细胞分别用PT-PCR和Western-blot法分析Muller细胞内PEDFmRNA和蛋白的表达。2.观察PEDF对VEGF的作用:PEDF处理组细胞培养液中加入不同浓度PEDF(10nmol·L-1、40 nmol·L-1 、160nmol·L-1、640nmol·L-1)24h后收集细胞分别用PT-PCR和Western-blot法分析Muller细胞内VEGFmRNA和蛋白的表达。 结果 VEGF处理组中,VEGF浓度为1000nmol·L-1、5000nmol·L-1时,PEDFmRNA分别为正常对照组的0.69倍(P<0.05)和0.44倍(P<0.01),PEDF蛋白分别为正常对照组的0.54倍(P<0.05)和0.52倍(P<0.05)。随VEGF浓度的升高,PEDFmRNA及蛋白表达均有逐渐减弱趋势。PEDF处理组中,PEDF浓度为40 nmol·L-1 、160nmol·L-1时,VEGFmRNA分别为正常对照组的0.61倍(P<0.05)和0.42倍(P<0.01),VEGF蛋白分别为对照组的0.70倍(P<0.05)、0.63倍(P<0.05)。随PEDF浓度的升高,VEGFmRNA及蛋白表达亦有逐渐减弱趋势。 结论 在Muller细胞内,VEGF对PEDF表达具有抑制作用,PEDF对VEGF也具有抑制作用,二者的负反馈调节作用可能在视网膜病理性新生血管中起重要作用。 |