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Muller细胞内色素上皮衍生因子与血管内皮生长因子的相互作用
作者:穆华  文章来源:哈尔滨医科大学附属第一医院  点击数583  更新时间:2012/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的 研究Muller细胞内色素上皮衍生因子(pigment epithelium derived factor,PEDF)与血管内皮生长因子(vascular endothelial factor,VEGF)的相互作用,为临床上治疗新生血管提供新的思路。
方法 大鼠Muller细胞原代培养,取第3代细胞用于实验。实验按以下操作进行:1.观察VEGFPEDF的作用:VEGF处理组培养液中加入不同浓度VEGF100nmol·L-1500 nmol·L-1 1000nmol·L-15000nmol·L-1),24h后收集细胞分别用PT-PCRWestern-blot法分析Muller细胞内PEDFmRNA和蛋白的表达。2.观察PEDFVEGF的作用:PEDF处理组细胞培养液中加入不同浓度PEDF10nmol·L-140 nmol·L-1 160nmol·L-1640nmol·L-124h后收集细胞分别用PT-PCRWestern-blot法分析Muller细胞内VEGFmRNA和蛋白的表达。
结果 VEGF处理组中,VEGF浓度为1000nmol·L-15000nmol·L-1时,PEDFmRNA分别为正常对照组的0.69倍(P<0.05)和0.44倍(P<0.01),PEDF蛋白分别为正常对照组的0.54倍(P<0.05)和0.52倍(P<0.05)。随VEGF浓度的升高,PEDFmRNA及蛋白表达均有逐渐减弱趋势。PEDF处理组中,PEDF浓度为40 nmol·L-1 160nmol·L-1时,VEGFmRNA分别为正常对照组的0.61倍(P<0.05)和0.42倍(P<0.01),VEGF蛋白分别为对照组的0.70倍(P<0.05)、0.63倍(P<0.05)。随PEDF浓度的升高,VEGFmRNA及蛋白表达亦有逐渐减弱趋势。
结论 Muller细胞内,VEGFPEDF表达具有抑制作用,PEDFVEGF也具有抑制作用,二者的负反馈调节作用可能在视网膜病理性新生血管中起重要作用。
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