目的:观察慢病毒载体介导的增强型绿色荧光蛋白(lenti-EGFP)通过两种途径体内转染大鼠角膜基质细胞的安全性,为角膜相关疾病的基因治疗提供实验基础。 方法:Lenti-EGFP通过角膜基质注射和刮除角膜上皮敷贴带lenti-EGFP的棉片两种不同方法体内转染大鼠角膜基质细胞,转染后定期裂隙灯观察,以3d、7d、26d、48d四个不同时间点收集角膜,固定后切片,HE染色光镜检查;电镜检查;Tunel法检测细胞凋亡。 结果:两组转染了lenti-EGFP的角膜各层细胞形态及超微结构与对照组相比无明显异常,各组细胞凋亡百分比差异无统计学意义。 结论:Lenti-EGFP通过上述两种转染途径均可安全的转染角膜基质细胞。 |