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不同剂量脑源性神经营养因子作用下视网膜色素变性组织内c-Jun蛋白质的表达特点
作者:殷晓贝  文章来源:首都医科大学附属北京同仁医院  点击数623  更新时间:2012/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进

目的 探讨不同剂量的脑源性神经营养因子作用下,出生后不同时期视网膜色素变性组织内c-Jun蛋白质表达的动态变化特征。

方法 分别取生后(postnatal,PN2周龄和3周龄的rd小鼠各16只,其中8只玻璃体腔注射使用浓度分别为50μg·L-1100μg·L-1BDNF2μL,即终浓度为25μg·L-150μg·L-1。另8只中,4只玻璃体腔注射相同体积的磷酸盐缓冲液作为治疗对照组,另4只不做处理为空白对照组。在处理后2周即分别为PN-4周龄和PN-5周龄时将小鼠处死。在将小鼠处死后30s内取出眼球,进行冰冻切片的制作和免疫荧光染色(按常规荧光染色程序进行),观察视网膜组织内c-Jun蛋白质的表达情况。Leica DM4000B荧光显微镜观察摄片,Image Pro Plus 6.0图像分析软件对摄片进行半定量分析,选用平均荧光强度为分析指标。取用同周龄的C57BL/6小鼠各4只为正常对照组。

结果 研究发现,PN-4周龄时,rd小鼠视网膜组织内c-Jun蛋白质的表达与其它各组相比具有明显不同的特点。在此期,正常对照组视网膜的内核层(inner nuclear layerINL可见表达,表现为层间细胞核的强着染。而空白对照组,治疗对照组和BDNF治疗组亦在INL有表达,其中,使用浓度为50μg·L-1BDNF注射组可见INL少量着染,使用浓度为100μg·L-1BDNF注射组可见INL强着染,且表达强度高于空白对照组和50μg·L-1BDNF注射组PN-5周龄时,正常对照组INL可见c-Jun蛋白质的表达。空白对照组,治疗对照组和BDNF治疗组亦可见INL细胞核的着染,其中,BDNF治疗组与空白对照组相比表达强度的差异不具有统计学意义。

结论 BDNF对不同病变时期RP组织内凋亡和增殖相关蛋白质的表达有不同效果,病变早期较高的药物剂量干预可以有相关蛋白质的较高表达。



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