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EphrinA3调控成年小鼠视网膜干细胞增殖及分化的研究
作者:方媛  文章来源:复旦大学附属眼耳鼻喉科医院  点击数773  更新时间:2012/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
 

目的  成年哺乳动物的睫状体边缘区含有视网膜干细胞(Retinal stem cellRSC),RSC在体外增殖能力强,且可以分化为几乎所有视网膜细胞,但在体内的增殖及分化能力有限。成年哺乳动物视网膜的抑制性环境可能是抑制RSC增殖分化的关键因素。故本研究旨在研究内源性分子EphrinA3对成年哺乳动物RSC增殖分化的调控作用。

方法  用免疫组化和蛋白印迹法检测小鼠眼球EphrinA3的表达部位和表达趋势,并且以EphrinA3基因敲除小鼠和野生型小鼠为模型,进行活体BrdU玻璃体腔注射,观察在体RSC的增殖分化能力,并且体外培养两种小鼠的RSC比较它们的增殖和分化能力。

结果  EphrinA3表达于视网膜及睫状体上皮细胞,并随小鼠生长发育表达增强,在成年期达到最高峰。敲除EphrinA3基因后,体内及体外实验均证实RSC增殖能力有所提高。RT-PCR证实敲除EphrinA3基因的RSC表达更高水平的神经干细胞标记物(Sox2)和感光细胞前体细胞标记物(Crx, Nrl and Nr2e3)。EphrinA3基因敲除后的RSC更容易分化为视网膜神经细胞及感光细胞。

结论  EphrinA3是成年小鼠体内对RSC增殖分化有抑制性作用的内源性调控分子。

 

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