目的 探讨中药角膜安抑制潜伏单纯疱疹病毒性Ⅰ(HSV-1)再活化作用及其分子机制。
方法 以HSV-1 Mckrae株接种BALB/c小鼠右眼角膜,建立潜伏感染HSK模型,用紫外线B光照射激活潜伏病毒。在照射前21天开始予中药分高(JMA-h,36g·kg-1·d-1)、中(JMA-m,18g·kg-1·d-1)、低(JMA-l,9g·kg-1·d-1)三剂量组口服治疗,以口服无环鸟苷片(ACV,0.18g·kg-1·d-1)和病毒模型组(HSV,自然喂养)作对照。在治疗21d 和病毒激活后的第 1d,每组分别处死动物6只,应用所建立的HSV-1DNA新型TaqMan-MGB探针荧光定量(绝对定量)PCR检测方法,对其角膜接种病毒的同侧三叉神经节(TG)内HSV-1DNA拷贝数进行检测(60个摸板DNA,重复3次循环)。
结果 HSV-1潜伏中期仍然有低水平的病毒DNA表达(拷贝数集中在102~103之间),各组之间病毒基因拷贝数比较无显著性差异(P > 0.05);在病毒激活后的第1天,HSV组和ACV组 TG内的病毒大量复制,HSV-1DNA表达丰富(拷贝数集中在104~105之间),JMA-m 、JMA-l组HSV-1DNA拷贝数明显减少(拷贝数集中在103~104之间),但较激活前明显增加13倍左右,(HSV组、ACV组约23倍左右),统计学处理有非常显著性差异(t JMA-m =3.2015、3.3369,p<0.01;tJMA-L =2.2389、2.3862,p<0.05)。
结论 角膜安对潜伏静止期病毒无抑制作用;对潜伏在TG内病毒再活化有抑制作用,但不是直接杀灭作用。
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