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体外原代培养人类视网膜色素上皮细胞初探
作者:徐国兴  …  文章来源:福建医科大学附属第一医院   点击数2487  更新时间:2004/7/4  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的:为探讨建立体外原代培养人类视网膜色素上皮细胞(RPE)技术。方法:取自愿者贡献的意外事故成年眼球,用0.25%胰酶消化获取人RPE细胞、15%胎牛血清的DMEM培养液培养,细胞接近融合状态时进行传代培养。结果:RPE原代细胞镜下为圆形,大小不一,内含较多的色素颗粒,胞核无法辨认。原代细胞培养贴壁后第3天增殖速度明显加快,至4-5天即可基本融合,细胞浆内色素颗则随传代次数增多而逐渐减少。第3代培养的视网膜色素上皮细胞膜表面可见微绒毛,细胞质内细胞器丰富,线粒体量多,体积较小,内外膜分界清晰,嵴较短。色素颗粒散在分布于胞浆内,多数细胞质内数量较少呈高电子密度包含物。溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)对原代培养的视网膜色素上皮细胞增殖有促进作用。结论:溶血磷脂酸可促进人类RPE细胞体外培养的增殖,第3代培养的视网膜色素上皮细胞可保留原代细胞的生物学特性。
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