| 【摘要】目的 建立多重PCR体系快速诊断临床常见的致病真菌并鉴定到菌属。
方法 通过设计不同的属特异性引物，建立一个多重PCR体系对真菌性角膜炎常见的镰孢、曲霉、青霉及弯孢4个菌属的9种致病——菌腐皮镰孢菌，禾谷镰孢菌，木贼镰孢菌，串珠镰孢菌，烟曲霉菌，黄曲霉菌，黑曲霉菌，新月弯孢菌，牵连青霉菌的DNA进行检测，并将此方法应用于临床分离菌株的检测。
结果 经过多重PCR体系扩增后，琼脂糖凝胶电泳结果显示镰孢菌扩增出了长度为360bp的条带，曲霉菌扩增出了长度为430bp的条带，牵连青霉菌扩增出了长度为245bp的条带，新月弯孢菌扩增出了长度为300bp的条带。人基因组DNA及其他眼部常见的致病微生物DNA则未扩增出条带。表明本体系具有高度的特异性。将不同稀释梯度的模板加入反应体系中进行扩增，扩增产物在琼脂糖凝胶电泳下检测，结果显示本体系的敏感性为10fg。
结论 多重PCR体系可对临床常见致病真菌快速诊断并鉴定到菌属，方法快速，敏感，特异。 |
