| 目的 观察地塞米松对牛眼小梁细胞水通道蛋白－1（Aquaporin-1,AQP1）表达的影响，为探索激素性青光眼的发病机制提供一条新的思路。 方法 体外培养牛眼小梁细胞,取第4代细胞鉴定后用于实验。采用浓度为5，25，50，250μg/L地塞米松作用体外培养牛眼小梁细胞7天，然后 通过Western Blot方法和免疫组织化学技术检测原代培养的牛眼小梁细胞在不同浓度地塞米松作用下AQP1在蛋白水平的表达变化。结果 1．免疫组化技术检测结果显示：AQP-1在体外培养的牛眼小梁细胞上呈阳性表达，免疫反应阳性信号位于胞浆与胞膜；经不同浓度地塞米松处理组的AQP-1阳性表达都较未经地塞米松处理组的AQP-1阳性表达弱，而且随着地塞米松浓度增加，AQP-1阳性表达越来越弱，阴性对照未见阳性信号。2．Western Blot检测结果显示：未经地塞米松处理组和经不同浓度地塞米松处理组在提取的小梁网细胞的20μg蛋白质中均可检测出分子量为约28KDa的AQP1蛋白质条带，与未处理组比较，地塞米松各浓度组AQP1蛋白表达量均降低，而且随着地塞米松浓度增加，AQP1蛋白表达量逐渐下降，蛋白条带越来越弱。3.经免疫组化技术检测和Western Blot检测结果均提示：地塞米松使体外培养的牛眼小梁细胞上AQP1蛋白质的表达减少，且地塞米松浓度越大，细胞上AQP1蛋白质表达越少，地塞米松对AQP1蛋白表达的抑制作用呈明显的剂量依赖性。结论 地塞米松使体外培养的正常牛眼小梁细胞AQP1的表达减少，这可能是糖皮质类激素性青光眼房水流出阻力增加的原因之一。 |
