| 摘要 目的：通过计算机程序模拟组织型谷氨酰胺转移酶 (tissue transglutaminase, tTG)基因的mRNA二级结构，优化反义寡核苷酸 (antisense oligodeoxynucleotide, ASODN)药物设计，为有效抑制小梁细胞表达tTG提供新的途径。方法：根据牛tTG mRNA的二级结构，选择环区（1496-1516）、环与茎结合区(280-300) 和茎区(2720-2740)作为反义药物作用的靶点，分别合成ASODN1、 ASODN2、ASODN3，用脂质体包埋后转染牛眼小梁细胞。通过半定量RT-PCR法检测转染后tTG mRNA表达的变化来评价tTG-ASODN的生物学效应。结果tTG-ASODN1、tTG-ASODN2、tTG-ASODN3对tTG mRNA的表达均有抑制作用，与空白对照组相比有显著性差异(P<0.05)，且tTG-ASODN1与tTG-ASODN2的抑制作用明显强于tTG-ASODN3(P<0.05)。结论 选择环区或环与茎连接的部位作为反义作用的靶点，其反义作用明显强于其他区域。从机制上讲，可能是因为环区或环与茎连接的部位的形成需要吸收能量，是整个tTG mRNA序列中最不稳定的区域，ASODN容易接近而发挥作用，提示通过tTG mRNA二级结构的模拟是设计反义药物的新途径。 |
