| 目的:探讨主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ类抗原转录激活因子（MHCⅡtransactivator CⅡTA）的化学合成小干扰RNA(small interfering RNA) 抑制大鼠角膜基质细胞表面的MHCⅡ类抗原表达的可行性。
方法:设计并合成靶向CⅡTA基因的5条SiRNA (SiRNA1, SiRNA2, SiRNA3,SiRNA4, SiRNA5),在阳离子脂质体的介导下转染大鼠角膜基质细胞。于转染后24小时收集细胞,用荧光定量PCR方法检测CⅡTA和 MHCⅡmRNA水平的改变;流式细胞仪检测MHCⅡ细胞水平表达的变化。
结果:体外合成的5条SiRNA通过脂质体转染大鼠角膜基质细胞后,均能不同程度地抑制CⅡTA和 MHCⅡ的表达。荧光定量PCR检测显示SiRNA1、SiRNA2、SiRNA3、SiRNA4、 SiRNA5转染后大鼠角膜基质细胞的CⅡTA、MHCⅡmRNA水平的表达均受到不同程度的抑制，与对照组相比，均具有显著的统计学差异（p<0.001）。其中以SiRNA-4组的抑制作用最明显，对CⅡTA、MHCⅡmRNA水平的抑制率分别为95.1%±1.25%，82.7%±1.95%。转染后24小时的流式细胞仪检测显示SiRNA-4组的MHCⅡ细胞水平的表达抑制率为81.9%±1.23%。
结论:在大鼠角膜基质细胞中，靶向CⅡTA的SiRNA通过抑制自身mRNA的表达,从而阻止了其调控的MHCⅡ类分子在mRNA水平和蛋白水平的相应表达。克服了由于MHC-Ⅱ类基因存在共显性和大量的复等位基因而直接设计针对MHC-ⅡSiRNA的困难，为进一步研究利用RNAi技术抑制MHCⅡ的表达从而防治角膜移植或角膜缘移植排斥反应提供了理论和实验基础。
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