目的:探讨急性视网膜缺血后视网膜NOS、c-Fos的表达变化了解NO、NOS与c-fos基因在视网膜缺血损伤中的功能联系,为进一步阐明视网膜缺血的机制和应用c-fos基因表达作为缺血刺激后视网膜神经元活性的标志提供实验依据。
方法:成年SD大鼠48只,分正常对照组、缺血组(依再灌注后存活时间不同分15min、30min、1h、2h、4h、12h、24h组)。缺血组,右眼取视网膜缺血模型,左眼作为非缺血假手术自身对照。采用视网膜铺片NADPH-d组化、c-Fos免疫组化的单、双标等技术检测急性缺血后视网膜NOS和c-Fos的表达。用SPSS11.0统计分析软件包处理数据,采用配对t检验、方差分析、最小显著法、一般线形模型和LSD进行显著性检验。
结果:急性视网膜缺血30min再灌注30min和24h 视网膜内层NOS阳性神经元平均灰度比正常组和非缺血假手术自身对照组显著降低。再灌注24h,可见部分NOS阳性神经元突起着色加深。视网膜内层c-Fos阳性神经元数在视网膜缺血30min再灌注1h明显增多,2h达高峰,4h后逐渐下降,24h恢复正常水平。双标显示NOS阳性神经元及突起与c-Fos阳性神经元相接近,极少有双染细胞。
结论:视网膜缺血30min后视网膜NOS阳性神经元内的NOS表达明显增加。视网膜缺血30min可诱导视网膜内层神经元c-Fos快速、一过性的表达。视网膜c-fos基因表达和NOS表达存在一定的联系,NO和c-fos基因可能共同参与了急性视网膜缺血的早期损伤过程。
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