目的:探讨视网膜光损伤的发生机制以及雌激素对光诱导的视网膜感光细胞凋亡的抑制作用。方法:选用健康成熟雌性SD大鼠30只纳入处理组,随机分为:去势组、假去势组和去势+雌激素组。另外8只大鼠未作任何处理,纳入正常对照组。切除卵巢术后1w起去势+雌激素组大鼠开始皮下注射雌激素50µg/kg,隔日一次。术后2w将处理组大鼠逐只放入光照箱内接受12h亮、12h暗(12:12)的循环光照射,共14次,光照强度为600±35.4lux 。所有动物均行右眼的暗视蓝光ERG、暗视白光ERG检测。摘除右眼球,测量视网膜外核层的厚度,TUNEL法检测外核层凋亡的感光细胞,免疫组化染色观察视网膜NOS的表达及分布。结果:去势组、去势+雌激素组和假去势组大鼠血清雌激素浓度分别为45.99±10.41pmol/L、 153.64±29.34pmol/L、136.04±51.69pmol/L,去势组与去势+雌激素组和假去势组之间的差异有显著的统计学意义(q=-6.9103,-5.7803;P=0.000,0.000)。处理组较正常对照组的b波振幅明显下降。去势组、去势+雌激素组大鼠和假去势组大鼠暗视蓝光ERG b波振幅24.30±8.44µv、40.05±10.59µv和37.52±10.01µv,去势组与去势+雌激素组和假去势组之间的差异有显著的统计学差异(q=-3.0129,-2.5299,p=0.005,0.017)。去势组、去势+雌激素组和假去势组暗视白光ERG b波振幅分别为38.54±11.86µv、66.61±16.97µv和62.74±17.89µv,去势组与去势+雌激素组和假去势组之间有显著的统计学差异 (q=-3.4822,-3.0015,p=0.002,0.005)。正常对照组大鼠视网膜组织结构层次分明,外核层感光细胞核排列紧密,染色均匀,形态规整。外核层未见被标记的阳性凋亡细胞,视网膜上未见NOS阳性着色细胞。光照后处理组外核层都有不同程度变薄,其中去势组外核层明显薄于其他两组。去势组、去势+雌激素组和假去势组外核层被TUNEL法标记的阳性凋亡细胞数分别为(27.53±6.95)个/1000µm2、(16.15±5.44)个/1000µm2和(17.49±5.97)个/1000µm2,去势组与去势+雌激素组和假去势组两组之间的差异有显著的统计学意义(q=4.1370,3.6497;p=0.000,0.001)。处理组视网膜的内核层有深、中、轻度不同程度着色细胞,其免疫反应产物位于胞浆,为棕黄色。IOD测定结果为:去势组0.3675±0.06621,去势+雌激素组0.2941±0.03498,假去势组0.3027±0.03217。去势组与去势+雌激素组和假去势组之间的差异有统计学意义(q=3.4885,3.0798;p=0.002,0.005)。结论:低强度的循环光照射可造成大鼠视网膜的损伤,诱导感光细胞的凋亡。雌激素可通过调控NOS的合成,抑制感光细胞的凋亡而对视网膜光损伤具有保护作用。 |