目的
探讨中药单体枸杞多糖(Lycium Barbarum Polysaccharides, LBP)对氧化损伤所致晶状体上皮细胞(lens epithelial cell ,LEC)凋亡的抑制作用及其对细胞内游离Ca2+浓度的影响。从抑制细胞凋亡及影响细胞信号转导的角度进一步揭示中药防治白内障的细胞和分子学机制,为从中药中寻找确切有效防治白内障药物提供科学的实验依据。
方法
取培养的传第三代的牛晶体上皮细胞(BLECs), 模型组以300μmol/L H2O2与BLECs共同培养24小时,药物组再加入终浓度为1g/L LBP共同孵育。采用流式细胞仪(flow cytometer, FCM)检测各实验组的细胞核DNA含量及凋亡二倍体峰,以荧光分光光度法和Fura-2/AM荧光探针检测各实验组细胞内游离Ca2+浓度。
结果
模型组经FCM直方图分析G1期前可见亚G1峰,即凋亡峰,细胞内游离钙离子浓度(234.125±25.689)明显升高,与空白对照组(98.355±8.978)比较有非常显著性差异(p < 0.01);药物组细胞凋亡率(17.36±3.12)%,介于对照组凋亡率(0.05±0.09)%与模型组凋亡率 (51.96±3.12)%之间,均有显著性差异(p < 0.01)。药物组细胞内游离钙离子浓度(139.605±17.989)与H2O2 组有显著性差异(p < 0.01)。
结 论
枸杞多糖可有效抑制H2O2诱导的LECs凋亡,其作用机制可能为通过抑制细胞内游离钙离子浓度的升高,阻断Ca2+-钙调蛋白依赖性蛋白激酶途径和Ca2+-蛋白激酶C信号转导途径。
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