目的:应用二维电泳分离先天性遗传性白内障的晶状体总蛋白,探讨基因突变小鼠的蛋白质变化。
方法:采用先天性遗传性白内障小鼠动物模型,为自发的γS突变隐性遗传小鼠。将5周龄的白内障小鼠和正常小鼠分为两组,提取晶状体总蛋白,上样量分别为882μg和190μg。进行固相PH梯度(IPG)等电聚焦双向电泳,胶体考马斯亮蓝R-250染色,使用PDQuest 7.30图像分析软件分析电泳图像。
结果:882μg的上样量能够较好地分离低丰度蛋白,而190μg的上样量可分离高丰度蛋白。上样量为882μg时,白内障和正常小鼠分别检测到417个蛋白点和370个蛋白点。以白内障图谱为参考胶,正常组和白内障组的匹配率分别为53%和67%。正常组和白内障组有160个蛋白点匹配。只在白内障组中表达的蛋白点有242个,而只在正常组表达的蛋白点有163个。与正常组相比,白内障组相差4倍以上的上调点有9个,相差4倍以上的下调点有9个。上样量为190μg时,白内障和正常小鼠分别检测到57个蛋白点和60个蛋白点。
结论:与正常晶状体相比,先天性遗传性白内障有明显的差异性蛋白表达谱,推测先天性遗传性白内障与多种差异蛋白有关,尚须进一步质谱鉴定。
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