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| 增强型绿色荧光蛋白基因在人胚胎视网膜前体细胞中的表达* |
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| 作者：康前雁1、… 文章来源：西安交通大学医学院, 1环境与疾病相关基因教育部重点实验室,神经科学研究中心 2附属第一医院眼科 点击数1819 更新时间：2005/6/12 16:10:33 文章录入：kangqy 责任编辑：毛进 |
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| 目的：研究增强型绿色荧光蛋白基因(enhanced green fluorescent protein ,EGFP)转染人胚胎视网膜前体细胞的可行性、转染效率及瞬时表达情况，建立人胚胎视网膜前体细胞的示踪方法，为视网膜前体细胞移植提供示踪依据。
方法：在大肠杆菌中扩增pEGFP－N1质粒，通过磷酸钙介导法转染人胚胎视网膜前体细胞，应用流式细胞仪检测其转染效率，荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察其体内、体外瞬时表达情况。
结果：pEGFP－N1在基因转染24ｈ时细胞转染率为28.9%，48h时为32.4%，72ｈ时为30.4%，对照2.04%；体外观察培养细胞转染24h时已有绿荧光表达，48h-72h时细胞荧光强度最强，96h时荧光强度减弱；体内观察视网膜下移植转染的细胞1周有较多绿荧光表达，2周时荧光细胞减少，4周时仍有少量表达绿荧光细胞。
结论： pEGFP－N1质粒能有效转染人胚胎视网膜前体细胞，其转染效率可达到30%,并能持续表达4周以上，是人胚胎视网膜前体细胞较为理想的瞬时表达载体和体内细胞示踪报告分子。
*基金项目: 国家自然科学基金资助项目（30170300, 30200291）、陕西省科技攻关项目（2002K10-G8）及西安交通大学自然科学基金资助项目 |
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