目的 通过对新鲜羊膜匀浆提取液对早期角膜碱烧伤兔模型角膜上皮愈合和角膜新生血管增生面积及速率,以及角膜组织病理学等方面改变的观察,探讨人羊膜匀浆提取液对角膜碱烧伤后早期新生血管增生的防治作用及其作用机制,为角膜碱烧伤后的早期治疗以及血管化角膜的预防开辟新的途径。
方法 选用30只新西兰兔制作角膜碱烧伤动物模型,并随机分为三组,每组10只。其中A组:羊膜匀浆提取液治疗组;B组:0.3%氧氟沙星治疗组;C组:生理盐水对照组。从模型制造当日开始分别给予新鲜羊膜匀浆提取液、氧氟沙星及生理盐水滴眼,4次/日。用药前和用药后30天内专人定期用裂隙灯显微镜结合荧光素染色法观察角膜创面愈合及角膜新生血管生长情况,并采用计算机图象分析系统照相记录角膜上皮愈合面积及新生血管增生面积,并进行统计学分析。实验结束后,处死兔模型取角膜进行组织病理学检查。
结果 (1)A、B及C组角膜新生血管开始出现时间分别为6.7 ±0.335 天,3.9±0.277天,3.8 ±0.291天,A组较B、C二组角膜新生血管开始出现时间明显延长 (P < 0.05) ,B 组与C组间差异无显著性(P > 0.05) 。(2)角膜碱烧伤后各观察时间点角膜新生血管增生面积比较,A组较B、C二组均明显减少(P < 0.05),B 与C 组间差异无显著性(P > 0.05)。(3)角膜碱烧伤后角膜上皮愈合速率:A组角膜上皮修复快而且平稳,B组修复稍慢但有反复波动现象,C组修复缓慢而且出现反复性角膜上皮糜烂缺损。(4)角膜组织病理学检查: ① HE染色:A 组角膜炎性反应较轻,碱烧伤区边缘仅有少量新生血管增生;B组角膜可见较多炎性细胞浸润,烧伤区有较多新生血管形成;C 组碱烧伤区角膜可见大量炎性细胞浸润及粗大的角膜新生血管形成。②多形核白细胞(PMN)密度计算(个/1000µm2):A组9.1±3.381,B组13.2±2.573,C组18.8±5.903,三组间均有显著性差异(P < 0.05)。
结论 新鲜羊膜匀浆提取液对兔角膜碱烧伤后早期角膜新生血管生长有显著的抑制作用。同时,还能抑制兔角膜碱烧伤后早期炎症反应,促进角膜上皮生长,色素上皮源性生长因子(PEDF)等生物活性因子可能在其中发挥了重要的作用。
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