| 目的：探讨神经生长因子（NGF）对可见光诱导的体外培养的人视网膜色素上皮细胞凋亡的保护作用 方法：（1）用传代培养的人视网膜色素上皮细胞，分为A.空白对照无光照组。B.光照组：6h、12h、24h光照组，均以（2000±500）Lx光照强度照射，光照时间分别设为6h、12h、24h，建立起可见光诱导下的细胞凋亡模型。C.药物组：无光照+NGF，6h+NGF，12h+NGF，24h+NGF，所加入的NGF浓度均为500µmol•L-1。所有细胞均为同一系、同一代。（2）采用荧光染色和透射电镜、流式细胞仪等方法观察、检测光照对视网膜色素上皮细胞的凋亡作用，以及加入浓度为500µmol•L-1的NGF对hRPE细胞的保护作用 结果：（1）荧光显微镜及透射电镜下观察光照后的hRPE细胞，可见凋亡细胞，细胞核、细胞质固缩、细胞体积缩小、细胞呈圆形、透射电镜下可见凋亡小体；荧光显微镜计数结果显示：无光照组，6h、12h、24h光照组与相对应加入NGF组的凋亡指数相比较，无光照组凋亡指数（2.75±0.51）与无光照+NGF的细胞凋亡指数（1.48±0.12）比较有显著性差异（p﹤0.01）；在光照6h组凋亡指数（11.03±2.65）与光照6h+ NGF的细胞凋亡指数（7.026±1.30）比较有显著性差异（p﹤0.01）；比较光照12h组的凋亡指数（14.65±1.55）与光照12h +NGF的细胞凋亡指数（9.05±1.17）有显著差异（p﹤0.01）；比较光照24h组凋亡指数（17.69±2.07）与光照24h+NGF的凋亡指数（14.75±1.32）有显著性差异（p﹤0.01）；（2）流式细胞测定结果：6h光照组与无光照组比较,细胞凋亡差异有显著性的意义（p﹤0.01）,而细胞坏死的差异无显著性的意义（p﹥0.05）。12h和24h光照组无论是细胞凋亡还是坏死均与对照组差异有显著性的意义（p﹤0.05）。12h光照组与6h光照组比较，只有细胞凋亡差异有显著性的意义（p﹤0.05），而细胞的坏死差异无显著性的意义（p﹥0.05）。24h光照组与6h光照组相比，细胞凋亡及坏死差异均有显著性的意义（p﹤0.05）。12h光照组与24h光照组之间凋亡差异无显著性的意义（p﹥0.05），但是细胞坏死却表现出明显差异（p﹤0.05）。结论：500µmol•L-1神经生长因子对（2000±500）Lx光照强度可见光诱导的RPE细胞具有一定的保护作用，随着光照强度的增加，细胞凋亡及坏死数量递增，在一定范围内神经生长因子对hRPE具有保护作用。神经生长因子可作为今后临床上治疗由光损伤引起的视网膜病变提供新的途径。 |
