| 目的：甲状腺相关眼病（thyroid-associated ophthalmopathy,TAO）是眼眶常见病，其可影响患者的外观，危及患者的视力，影响患者的正常生活。该病的发病机制不清，目前认为是一种自身免疫性疾病，多数学者认为眶后成纤维细胞是TAO自身免疫的靶细胞和效应细胞。目前TAO的治疗较局限，缺乏特效的药物。本实验应用透明质酸酶作用于体外培养人眶后成纤维细胞，观察其对成纤维细胞增殖和透明质酸分泌的影响，为该药物用于临床治疗甲状腺相关眼病提供实验室证据。方法：组织块培养技术建立正常人眼眶后成纤维细胞系，经波形蛋白染色和HE染色鉴定，并绘制成纤维细胞的生长曲线。正常对照组采用空白培养液，实验组应用浓度分别为12.5 U/ml，25 U/ml，50 U/ml，100 U/ml，200 U/ml的透明质酸酶作用于体外培养的眶成纤维细胞， MTT比色法及放射免疫法测定透明质酸酶对正常人眼眶成纤维细胞增殖和透明质酸分泌的影响，并且在倒置显微镜下观察药物作用后成纤维细胞形态的改变。结果：药物作用24h后的细胞形态无明显的改变，结果分析上采用SPSS 11.5软件包进行单因素方差分析，得出透明质酸酶对体外培养的眶后成纤维细胞增殖抑制率分别为6.22％，2.67％，6.22％，12.89％，9.78％，无统计学意义；其可显著减少培养的上清液中透明质酸的量，有统计学意义。结论：在我们的实验中，透明质酸酶可有效地减少细胞培养上清液中透明质酸的量，但对细胞的增殖和活体形态影响不显著，推论临床可应用透明质酸酶治疗甲状腺相关眼病，但其具体的应用量和相关的副作用尚需进一步探索和相关的动物实验。 |
