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| 实验性青光眼大鼠模型诱导热休克蛋白27的表达 |
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| 作者：李燕, 袁… 文章来源：昆明医学院第一附属医院眼科 点击数1285 更新时间：2005/6/13 22:43:15 文章录入：李燕 责任编辑：毛进 |
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| 热休克蛋白（HSPs）：是由应激产生的一个蛋白家族，作为分子伴娘参与蛋白质的折叠、修复及退变，其分子量排列从10-90Kda。HSPs对不同形式的细胞应激反应时其表达上调。特异的HSPs过度表达能够防止凋亡细胞死亡。但是研究显示大多数的HSPs慢性、长期表达可诱导自身抗体产生，而这些自身抗体的存在与一些神经异常有关，体外实验证实HSP27自身抗体可加速神经细胞凋亡。目的：通过测定正常和青光眼的大鼠模型眼视网膜中HSPs （Hsp27，Hsp70 和Hsp90）的水平，探索HSPs与青光眼视神经病变可能的潜在关系。方法：在SD大鼠(100-150 克)模型中，电凝三组巩膜静脉，使眼内压升高，用Tonopen眼压计检测眼压，每周两次。实验过程中，取实验组中眼内压（IOPs）保持在27到35毫米汞范围内的大鼠进行研究；对侧眼为正常对照，眼内压在12到17毫米汞范围内。在大鼠眼压升高的第10，20和60天将其处死，一部分摘除的眼球用以剥离视网膜，经匀浆后提取视网膜总mRNA和蛋白质分别用于Northern blot和Western blots分析，并分别用18-sRNA 和beta-actin效正点样误差。另一部分摘除的眼球被固定于4%多聚甲醛后制作成8mm冰冻切片，进行免疫组化染色。结果：Northern blot分析显示：当眼压升高10天时，实验眼的Hsp27mRNA表达高出对照组水平205%。20天和60天Hsp27mRNA 水平分别高出对照组水平250% 和195%。Western blot分析显示：在眼压升高10、20及60天，视网膜Hsp27的水平高出对照组水平的285%。在实验眼视网膜内没有观察到Hsp70、 Hsp90的mRNA或蛋白质水平的变化。免疫组化结果显示，在正常对照视网膜，Hsp27表达仅见于视网膜血管及脉络膜。而实验眼，Hsp27同时还在视网膜神经节细胞层中过度表达。 结论：大鼠视网膜在高眼压状态下 Hsp27上调，而Hsp70和Hsp90没有变化。可能为眼内压升高导致的特定基因发生改变，而非一般转录水平的增加。Hsp27持续过度表达可能与青光眼视神经病变有潜在关系。
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