目的:运用原子力显微镜(Atomic Force Microscopy,AFM)观察老年性白内障晶体前囊膜形态结构改变及其与囊膜通透性的关系。
方法:将老年性白内障超声乳化手术中环形撕囊所得的晶体前囊膜(n=32)经10%福尔马林固定24-72小时后,用醇溶伊红轻染10秒钟,随后用去离子水清洗晶体前囊膜6次,每次5分钟(把固定液和伊红染料洗净)。将标本铺平固定在直径为1.5厘米的金属片上(中间贴有双面胶起固定作用),经自然干燥后,在空气中用AFM,非接触、清叩法(Non-contact,taping mode)获取表面形貌图片,并通过数码照相记录结果。
结果:用AFM观察,所有在扫描电镜(SEM)下所见到的晶体前囊膜的形态结构特征,均得到了证实。老年性白内障的晶体前囊膜的前表面,在AFM下同样可以清晰的看到正常的形态结构和异常之改变。靠近周边部的晶体前囊膜的前表面看上去相对比较光滑,无可辨认的形态结构。而中央部(瞳孔区)晶体前囊膜的前表面则高低起伏相对较大,提示有结构损坏。用AFM观察晶体前囊膜的后表面也同样是高低不平,晶体上皮细胞的胞体所在处与SEM比显得格外突出,呈半球形突起。AFM下可以看到SEM所看不到的晶体纤维是由更细的微纤维组成。将晶体囊膜包埋、切片、脱腊后观察其横断面,周边部晶体前囊膜的横断面,表面形貌较为平滑,均匀,同样无任何可辨认的结构。而在中央部,则可以看到,近前表面的1/3至2/3的囊膜横断面凹凸不平,其余的部分则依然比较平滑。
结论:本研究在世界上首次采用AFM观察了晶体前囊膜的前、后表面和横断面的形貌。证实了SEM所见的老年性白内障晶体前囊膜的形态改变和结构破坏。与SEM相比,AFM具有更高的分辨力,却无需特殊标本处理。因此,与SEM相结合,AFM可以更高的分辨率来研究眼部组织的形貌和结构改变。
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