目的:建立鸡形觉剥夺性动物模型,通过观察破坏视网膜色素上皮层(即RPE层)后小鸡后极部巩膜基质金属蛋白酶Ⅱ,即MMP-2的变化,探讨视网膜RPE层在小鸡形觉剥夺性近视(Form deprivation myopia,以下简称FDM)发生、发展中的影响作用。
方法:48只白色来亨鸡(鸡龄2天,SPF级)分为4组,每组12只,其中甲组、乙组在第二天即行双眼半透明眼罩遮盖同时行右眼玻璃体腔内一次注射庆大霉素(400μg);丙组不予遮盖仅行右眼玻璃体腔内一次性注射庆大霉素(400μg),左眼不作处理为自身对照;丁组不作任何处理(不遮盖不注药),为正常对照组。所有鸡均在37℃恒温,自然光线环境下12h:12h昼夜交替饲养。在第三周末,对全部小鸡行检影验光测屈光度后,将甲、丙两组处死,迅速摘除双眼球,测量其前后径。并取出两只送病理组织切片观察;乙组摘除双眼眼罩后继续饲养三周,在第6周末对乙、丁两组行检影验光后处死,摘除双眼球测量眼球前后径(所有眼球均在-80℃环境下保存)。用7mm直径环钻钻取后极部巩膜组织,在液氮冰冻环境下对其进行研磨后,加入组织溶液进行离心,取上清液作为标本,对所有标本采用ELISA(即酶联免疫吸附)试剂盒测定MMP-2活性浓度,通过测定各孔在波长405nm处的吸光度值间接反映各标本中MMP-2的含量。所有数据经过Excel和Spss统计软件进行处理。
结果:(1)第三周末,甲乙两组双眼屈光度之间均具有显著性差异(P<0.001),丙组和丁组双眼屈光度间无显著性差异(P=0.088,P=0.920),且甲乙两组与丙组双眼屈光度比较均分别具有显著性差异(P<0.001);甲组双眼眼轴测量值具有显著性差异(P<0.01),丙组双眼眼轴未见显著性差异
(P>0.05),甲组与丙组比较时,右眼眼轴无显著性差异(P>0.05),而左眼间差异具有显著性(P<0.001);(2)第六周末,乙组去遮盖后双眼屈光度及眼轴测量值之间均无显著性差异(P>0.05),且与丁组比较差异亦无显著性意义(P>0.05),但乙组去遮盖前后双眼屈光度之间具有明显显著性差异(P<0.001)。(3)ELISA结果显示,除了甲组双眼后极部巩膜MMP-2含量自身对照及与其他各组比较均有显著性差异外(P<0.001),另外三组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。
结论:视网膜RPE层在小鸡形觉剥夺性近视形成过程中起着重要的作用,尤其是对其巩膜基质中MMP-2的变化起着一定的调控作用,但单纯破坏视网膜RPE层对小鸡的正视化发展无明显影响。
关键词:形觉剥夺性近视/发生机制 巩膜 基质金属蛋白酶Ⅱ 视网膜色素上皮复合体 鸡
|