| 目的：（1）通过观察SD大鼠视神经夹伤后视网膜上生长相关蛋白-43（GAP-43）蛋白和基因的表达变化，了解玻璃体腔内注射睫状神经营养因子（CNTF）和腺病毒介导脑源性神经营养因子（Ad-BDNF）对视神经损伤、修复和再生的作用；（2）通过经上丘注射荧光金（FG）逆行标记视网膜神经节细胞（RGC）进行计数，观察SD大鼠视神经夹伤后玻璃体腔内注射CNTF和Ad-BDNF对视神经损伤后RGC存活的作用。
方法：应用蛋白电泳和免疫印迹法检查CNTF和Ad-BDNF对视神经夹伤后视网膜生长相关蛋白表达的影响；应用原位杂交方法检测CNTF和Ad-BDNF对视神经夹伤后GAP-43基因表达的影响；应用FG逆行标记RGC，全视网膜铺片RGC计数观察CNTF和Ad-BDNF对视神经夹伤后RGC存活的影响。
结果：正常成年SD大鼠视网膜上GAP-43呈现低表达，分子量约为47KD；正常成年SD大鼠视网膜上仅在节细胞层检测到少数细胞存在GAP-43mRNA杂交信号；经上丘注射荧光金后7天标记的正常成年SD大鼠视网膜上RGC数为2155±265个/mm2（n=12）。
结论：1. 正常SD大鼠视网膜上GAP-43呈现低表达，分子量约为47KD；正常情况下仅在节细胞层能检测到个别细胞存在GAP-43mRNA杂交信号；视网膜上RGC数为2155±265个/mm2。2. 模型中视神经夹伤后早期可以看到作为神经修复和再生标志的GAP-43及其基因的增强表达，说明视神经本身对于损伤有修复和再生的反应。3. 由逆行标记RGC计数可以看出视神经夹伤后RGC的死亡主要发生在神经损伤后2周以内。4. 大鼠视神经夹伤后玻璃体腔内注射重组人CNTF在视神经夹伤后早期能够提高视网膜上GAP-43的表达，并且能在夹伤后早期保护RGC的死亡，但这种作用不持久，视神经夹伤2周以后基本消失。5. 大鼠视神经夹伤后玻璃体腔内注射重组人Ad-BDNF在视神经夹伤后能够提高视网膜上GAP-43蛋白及其基因的表达，并且能够保护视神经夹伤后RGC的死亡，这种作用可以持续到夹伤后4周。
|
