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甘油4℃保存方法对羊膜活性影响的研究
作者:张军 崔巍…  文章来源:内蒙古自治区医院眼科  010017  点击数1564  更新时间:2005/6/15 12:52:19  文章录入:yunlina72  责任编辑:毛进
目的:了解100%甘油4℃保存方法对羊膜活性的影响。明确100%甘油4℃保存的羊膜有效保存期。 方法:取健康剖宫产产妇(足月妊娠,年龄25-30岁)胎盘,剥离羊膜,分成2.5×2.5cm2小块,保存于100%甘油4℃中,分别于3天、7天、14天、30天、60天、90天后进行光镜、电镜、酶组织化学[乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)]及免疫组织化学[碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)]观察,并与新鲜羊膜对比。 结果:(1)光镜下,100%甘油4℃保存60天以内羊膜上皮层结构较完整,上皮细胞边界清楚,可见少数细胞破裂,细胞核脱失。90天组,上皮层结构破坏明显,多数细胞破裂,核染色质有皱缩及核脱失、溶解、胞浆有空泡。(2)电镜下,100%甘油4℃保存90天多数上皮细胞膜破裂。但保存60天以内者细胞边界清晰,部分羊膜上皮细胞线粒体肿胀,嵴断裂,部分线粒体呈空泡样改变,及细胞核染色质边集。(3)酶组织化学(LDH、SDH)活性60天以内各实验组与新鲜对照组之间相比较差别无显著性(P>0.05),各组间两两比较亦无显著性差异(P>0.05)。而90天组与新鲜对照组及其他各实验组间两两比较均有显著性差异(P<0.05)。(4)免疫组织化学(bFGF)活性60天以内各实验组与新鲜对照组之间相比较差别无显著性(P>0.05),各组间两两比较亦无显著性差异(P>0.05)。而90天组与新鲜对照组及其他各实验组间两两比较均有显著性差异(P<0.05)。 结论:羊膜在100%甘油4℃保存60天内,其组织结构、上皮细胞活性均保持在相对稳定水平。而90天保存组与新鲜对照组及其他实验组两两比较均有显著性差异(P<0.05)。本研究进一步明确了100%甘油4℃保存方法的有效保存期,为术者选择优质羊膜提供了实验依据,从而可提高羊膜移植的疗效。 关键词:羊膜 甘油 活性 保存
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