目的 研究SARS冠状病毒(SARS-CoV)S蛋白与角膜上皮细胞功能性受体-血管紧张素转化酶2(ACE2)作用的机制。
方法 构建SARS-CoV S蛋白融合基因pS240-EGFP和pS666-EGFP,并在哺乳细胞中表达;半定量RT-PCR和免疫组化鉴定ACE2在角膜上皮细胞及心肺组织中的表达;酶联免疫吸附实验、冰冻切片免疫荧光法、流式细胞仪检测法、荧光显微镜检测法进行SARS-CoV S蛋白与角膜上皮细胞、非洲绿猴肾细胞的体外结合研究。
结果 构建了融合基因pS240-EGFP和pS666-EGFP;证实ACE2在角膜上皮细胞中有表达;角膜上皮细胞与SARS-CoV S蛋白能够结合,但结合能力很弱。
结论 角膜上皮细胞中存在ACE2,SARS-CoV S蛋白与角膜上皮细胞结合较弱。 本研究对了解SARS的病理机制及进一步研究SARS的防护和治疗具有一定的参考意义。 |