| 实验目的：探讨正常和损伤后的感光细胞中各种趋化因子和细胞因子的表达变化以及NF-κB和MAPKs在感光细胞凋亡中的作用。
实验方法：细胞免疫荧光染色、细胞凋亡检测、MTT法、RT-PCR、Western Blotting和Elisa等
实验结果：
1. 体外培养的661W细胞表达感光细胞的特异性标记物，光照损伤和小胶质细胞条件培养基（MGCM）可以诱导661W细胞凋亡；
2. SB203580能不同程度地抑制光照损伤诱导的感光细胞凋亡，U0126和PDTC能促进光照损伤诱导的感光细胞凋亡，而curcumin对细胞的光照损伤敏感性没有影响。
3. 正常情况下661W细胞表达低水平的iNOS及中等量的MCP-1、MCP-3、CX3CR1、CX3CL1、Eotaxin和Rantes；光照损伤后，除MCP-1、MCP-3、CX3CR1和CX3CL1的表达量未见明显的变化外，iNOS的表达量有明显增高，Eotaxin和Rantes的表达量有明显的降低，同时诱导表达IL-1β、MIP-1α、MIP-1β和TNFα；MGCM作用于661W细胞，引起细胞因子mRNA的表达情况与光照损伤后的类似，只是MGCM能诱导IL-10的表达，而光照损伤不能。
4. 正常情况下661W细胞表达高水平的NF-κB p65亚单位及微量的phospho-p44/42和phospho-JNK；光照损伤后，NF-κB p65亚单位的表达量明显的降低，而phospho-p38、phospho-p44/42和phospho-JNK的表达量明显升高；MGCM作用于661W细胞，引起phospho-p38、phospho-p44/42和phospho-JNK的表达情况与光照损伤后的类似，但是这并没有引起NF-κB p65亚单位活性的改变。
实验结论：
1. 感光细胞在正常状态下持续性表达几种趋化因子，受损伤后其表达趋化因子和毒性因子的量明显增加；
2. 小胶质细胞的条件培养基可诱导感光细胞凋亡，说明小胶质细胞能分泌毒性因子引起神经细胞的损伤；
3. 光照损伤诱导感光细胞凋亡主要通过抑制NF-κB活性和活化p38两条通路调控，小胶质细胞条件培养基诱导感光细胞凋亡主要通过活化p38通路调控；
4. 米诺霉素和菜菔硫烷通过抑制caspase-1或其上游的因子对光照损伤诱导的感光细胞凋亡发挥保护作用, 而对p38和ERK活性无影响，说明光照损伤中活化的MAPKs通路与NF-κB通路是相对独立的。
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