| 目的 探讨应用变性高效液相色谱技术（Denaturing high performance liquid chromatography, DHPLC）快速筛查TGFBI基因的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms, SNP）位点的可行性。
方法 取50个正常人外周血10ml，提取基因组DNA，聚合酶链反应（polymerase chain reaction, PCR）分别扩增TGFBI基因的17个外显子，应用DHPLC技术对17个外显子同时进行筛查，对发现有异常DHPLC波峰的样本相应外显子进行双向测序，并与正常基因序列比对，寻找SNP位点。
结果 在正常人TGFBI基因中发现了数种SNP位点。其中V 627 D位点突变及G 264 W、R 555 W双位点突变、N 272 N (816 C>T)及L601L (1803 G>A)单核苷酸多态性为首次发现。
结论 DHPLC技术具有高通量、经济、操作自动化等特点，为较理想的突变筛查工具，可用于角膜营养不良TGFBI基因突变的筛查。 |
