目的 研究神经生长因子(nerve growth factor, NGF)在实验性视网膜脱离(retinal detachment, RD)时对视网膜细胞凋亡的干预作用,探讨神经生长因子对视网膜脱离时对视网膜产生保护作用的机理。
方法 29只SD大鼠通过在视网膜下注射透明质酸钠的方法建立RD动物模型,并被分为NGF实验组、实验对照、正常对照共3组。NGF实验组和实验对照组共27只,54眼,其中7只14眼用于透射电镜观察凋亡细胞,20只40眼用作光镜观察。正常对照组2只,4只眼。分别在建立RD模型后观察1.5、3、6、12 h、1、2、4、8、16、32d。NGF实验组是在建立模型后玻璃体腔内注射NGF 5μg/5μl/次,每4天重复1次,实验对照组为注射空白载体作为对照。采用透射电镜和TUNEL方法观察凋亡,在高倍镜下(×40)使用0.5网形目镜尺计数2.5 mm2视网膜面积里的凋亡阳性细胞数,并进行统计学检验。
结果 正常对照组凋亡标记基本为阴性,细胞计数0.20±0.42个/2.5mm2。RD后无论NGF实验组还是实验对照组视网膜各层细胞均发现有细胞凋亡的发生,以内外核层分布为最多,凋亡细胞数随着脱离的时间而随之变化(p<0.001)。同时发现NGF实验组的内核层和神经节细胞层凋亡细胞数比实验对照组要少(p<0.001)。
结论 本研究在RD后给予外源性NGF,证明了其对视网膜细胞凋亡有显著的抑制作用,干预了RD后细胞凋亡的发生过程。NGF对RD后视网膜细胞产生保护作用的机理,与其能够抑制RD后视网膜细胞凋亡的发生有关。
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