目的:探讨Thapsigargin对人晶状体上皮细胞的凋亡作用,寻求预防后囊膜混浊的新途径。方法:采用MTT法、流式细胞术和透射电镜观察Thapsigargin对人晶状体上皮细胞系HLE-B3凋亡的影响。结果:MTT法显示:Thapsigargin浓度为0.01μM、0.05μM、0.1μM、0.5μM、1μM、5μM时,处理HLE-B3细胞72h后,测得其抑制率分别为(15.0±4.0)%、(40.1±2.4)%、(62.7±5.7)%、(75.3±2.6)%、(77.0±5.3)%、(86.8±3.8)%,求得其半数抑制浓度(IC50)为0.098 μM;流式细胞术发现不同浓度的Thapsigargin均可诱导HLE-B3细胞的凋亡,凋亡率呈时间和剂量依赖性,作用24h,TG浓度为0μM、0.01μM、0.1μM、1μM、10μM时,其凋亡率分别为(3.1±0.6)%、(7.8±1.2)%、(9.8±1.9)%、(14.8±3.8)%,作用48h,其凋亡率分别为(3.0±1.2)%、(8.7±1.3)%、(15.4±5.3)%、(22.5±3.4)%,作用72h,其凋亡率分别为(4.4±0.6)%、(13.9±1.3)%、(20.4±1.3)%、(25.2±4.7)%、(27.4±4.9)%;透射电镜检测发现细胞出现坏死、早期凋亡、晚期凋亡等形态。结论:TG体外可诱导HLE-B3细胞的凋亡,并呈现时间和剂量依赖性。 |