| 摘要
【目的】体外培养、纯化灵长类动物恒河猴的皮肤干细胞，向结膜上皮细胞诱导分化，探索皮肤干细胞的可塑性。【方法】体外培养恒河猴皮肤干细胞，用Ⅳ型胶原纯化，纯化前后用流式细胞仪检测β1整合素和角蛋白15阳性细胞比例，纯化后的皮肤干细胞用细胞免疫荧光和RT-PCR技术鉴定β1整合素和角蛋白15。皮肤干细胞转染绿色荧光蛋白基因，24小时后挑选出有荧光的细胞，与结膜上皮细胞共培养10天，再进行结膜上皮细胞的特异性抗原粘蛋白4和角蛋白4的鉴定，检测方法包括细胞免疫荧光和RT－PCR。【结果】体外培养的皮肤干细胞纯化后比例接近90％。细胞免疫荧光和RT－PCR检测β1整合素和角蛋白15阳性。转染绿色荧光蛋白基因24小时后，细胞呈现绿色荧光，与结膜上皮细胞共培养10天后，细胞免疫荧光和RT-PCR检查粘蛋白4和角蛋白4阳性。【结论】在体外培养纯化的灵长类动物恒河猴皮肤干细胞，在适宜条件下，可诱导分化为有结膜上皮细胞特征的细胞。
国家高技术研究发展计划863计划（2003AA205050）、广东省科技计划项目：组织工程重大专项（A302020101）、广东省科技计划项目（031734）资助 |
