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蛋白激酶C亚型在人眼视网膜色素上皮细胞中的表达
作者:高前应,…  文章来源:中山眼科中心  510060  点击数1676  更新时间:2005/6/20 15:48:10  文章录入:zhshgj  责任编辑:毛进
目的:蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)是转导细胞外信号到细胞内反应的细胞内酶家族,广泛参与细胞信息传递、离子通道调节、细胞增殖、分化及癌变等一系列与生命现象相关的过程。已有研究显示,在人眼视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞中,发现PKCα、PKCβⅠ、PKCβⅡ、PKCδ亚型在蛋白水平有表达。本研究旨在从3种表达水平检测PKC亚型在人眼RPE细胞中的表达情况。方法:体外培养4~8代人眼RPE细胞,利用激光共聚焦显微镜(Laser scanning confocal microscope, LSCM)和免疫荧光的方法从细胞水平检测PKC亚型在RPE细胞的空间分布;用RT-PCR和Western blotting方法从基因和蛋白水平来测定PKC亚型在RPE细胞的表达。结果:3种水平上发现PKC亚型在人眼RPE细胞中有基本相似的表达结果。LSCM发现在RPE细胞中有PKCα、PKCβ、PKCδ三种亚型的分布;RT-PCR显示有PKCα(327bp)、PKCδ(189bp)的mRNA表达。western blotting可以检测到PKCα(82KD)、PKCδ(78KD)的蛋白印迹条带。而三种方法均未发现其他PKC亚型的表达。结论: 人眼RPE细胞的PKC亚型有独特的表达特点,均发现有PKCα和PKCδ的表达,为进一步研究PKC信号在RPE细胞增殖和增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)中的作用提供坚实的实验基础。 关键词:蛋白激酶C; 同工酶; 视网膜色素上皮细胞 通讯作者:高前应,E-mail: gaoqy@hotmail.com 基金资助:国家自然科学基金(30200306)
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