目的: 分离培养视网膜母细胞瘤(Rb)中的肿瘤干细胞, 并研究其分化特性。
方法: 肿瘤标本取自本中心临床病理确诊的视网膜母细胞瘤患者,采用无血清化学限定的生长培养基分离培养Rb实体瘤中的肿瘤干细胞,收集体外培养7~15天的肿瘤干细胞,在分化培养基上进行分化,用电镜、免疫组化、流式细胞术等方法鉴定。
结果: 视网膜母细胞瘤中的部分细胞在无血清培养基中能够存活,增殖,形成圆形、自由漂浮的肿瘤球体,或神经样球体,这种细胞球表达了视网膜干细胞的标志抗原Pax6,Nestin,Chx10,并可连续传代;在分化培养基上可以分化出具有丰富细胞突起、梭形、多角形或棒状的视网膜细胞,分别表达Map2,β-III Tubulin,PKC,GFAP 等。
结论:视网膜母细胞瘤中存在具有自我增殖、分化能力的视网膜干细胞样的肿瘤干细胞。此类细胞可能是视网膜母细胞瘤恶性增殖的根源,也将是视网膜母细胞瘤治疗的新靶点。
关键词:视网膜母细胞瘤;肿瘤干细胞;无血清培养基
通讯作者:葛坚,广东省广州市中山眼科中心,510060
基金资助:本课题受国家自然科学基金项目(No.30271386)、卫生部临床重点学科项目(No 2004468)、国家自然科学基金(30200308 )
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