1 目的
探讨治疗前(活动期)和治疗后(静止期)Vogt-小柳原田病患者外周血单个核细胞T-bet mRNA 和蛋白的表达和意义。
2 方法
抽取16 名Vogt-小柳原田病患者治疗前(活动期)、治疗后(静止期)和16名正常人外周静脉血。采用ELISA检测血清和外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC)培养上清液中IFN-γ、IL-2、IL-4的浓度;采用密度梯度离心法分离PBMC,将得到的PBMC分成二等份(每份约4~5×106细胞/ml),一部分直接进行半定量RT-PCR和 Western免疫印迹,另一部分接种于24孔板,经PHA刺激约72h后,再用半定量RT-PCR和 Western免疫印迹检测T-bet mRNA 和蛋白水平。
3 结果
在经PHA刺激的患者PBMC培养上清液中IFN-γ的含量明显高于正常对照组。活动期患者T-bet mRNA的表达显著高于静止期和正常对照,静止期和正常对照无显著性差异。活动期患者均能检测到分子量为62kDa 的特异性免疫印迹带,而静止期和正常对照却没有发现。PHA 刺激后患者活动期与静止期、正常对照的T-bet mRNA和蛋白的表达却无显著差别。
4 结论
活动期患者T-bet mRNA和蛋白表达明显高于静止期VKH和正常对照,而静止期VKH和正常对照无明显差异。 从分子水平证实了Vogt-小柳原田病是Th1细胞偏离,同时也表明了T-bet可能加剧了Vogt-小柳原田病的炎症反应。
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