【摘要】 目的 体外培养大鼠视网膜前体细胞(RPCs),了解表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及睫状神经营养因子(CNTF)对其分化的影响。方法 取孕18d的SD大鼠胚胎眼的视网膜,分别用悬浮法及贴壁法培养。传至第一代后转入分别含10ng/mlCNTF、20ng/mlEGF、10ng/mlbFGF、10%胎牛血清的DMEM:F12中进行诱导分化,贴壁后2,3,4,6d分别行nestin及Opsin、GFAP的二步法免疫组织化学染色。 结果 大鼠的RPCs在悬浮时呈球状生长,nestin 染色阳性,悬浮培养传至一代,贴壁培养传至五代,可在体外分化为含视网膜光感受器细胞及胶质细胞的混合神经元。CNTF、b FGF及EGF不同程度地增加了光感受器细胞的比例。 结论 RPCs可在体外培养并传代。CNTF、b FGF及EGF参与了视网膜发育的调节。 |