| 目的：研究炎性因子(白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子(TNF-α))作用后，培养人视网膜色素上皮(RPE)细胞的移行，及细胞内钙离子水平([Ca++]i)的变化；及分别联合白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1rA)、染料木黄酮(genistein)、地塞米松作用后上述指标的变化情况。方法：用环钻和棉签制作一个刮伤模型，观察IL-1β和TNF-α及分别联合IL-1rA、genistein和地塞米松作用下，计数hRPE细胞跨过损伤区的细胞数量；用Fluo-3AM负载hRPE细胞，激光共聚焦显微镜检测[Ca++]i。 结果：IL-1β和TNF-α刺激hRPE细胞移行(图1 )，IL-1rA、genistein和地塞米松均可以抑制IL-1β和TNF-α刺激hRPE移行的能力(图2,3,4)。预处理IL-1β和TNF-α后，刮伤区移行的细胞较对照组细胞内Ca++水平升高，RPE细胞内荧光强度升高约204%(图5,6,7,8)； 加入100μg•L-1IL-1rA作用于hRPE，细胞内荧光迅速减弱，至接近基线水平(图9)。100μMgenistein作用后，细胞内荧光迅速减弱，至接近基线水平(图10)。10mg•L-1地塞米松作用后，细胞内荧光减弱，约为对照组的23%(图11)。 结论：炎性因子刺激hRPE细胞移行，并刺激[Ca++]i 水平升高；IL-1rA、genistein和地塞米松可以抑制炎性因子刺激的hRPE细胞移行及[Ca++]i 水平。 |
