| 【目的】构建NT4-NAP 融合基因并探讨对兔虹膜色素上皮细胞的保护作用。【方法】采用非对称互补引物/模板法，制备两端含有酶切位点的NAP的cDNA，将其连接到神经营养素4（NT4）的的信号肽与前导序列的3，端，组成融合基因NT4-NAP，利用基因重组技术，包装重组腺病毒r-AAV-NAP。采用酶消化加机械分离的方法培养兔虹膜色素上皮细胞。将重组腺病毒r-AAV-NAP转染于培养的兔虹膜色素上皮细胞,设置未转染兔虹膜色素上皮细胞对照组，观察NAP对兔虹膜色素上皮细胞的作用。【结果】采用MTT法测定，转染重组腺病毒r-AAV-NAP的兔虹膜色素上皮细胞组增殖明显。采用流式细胞仪检测,转染重组腺病毒r-AAV-NAP的兔虹膜色素上皮细胞组凋亡率低于未转染组。【结论】 R-AAV-NAP对兔虹膜色素上皮细胞具有保护作用。
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