| 【摘 要】目的 研究人骨髓间质干细胞(hMSCs)在体外与损伤的人角膜缘干细胞（hLSCs)共培养时的转化情况。方法 体外分离培养hMSCs和hLSCs，用CD34、CD44免疫细胞化学法和流式细胞术对hMSCs进行鉴定；角蛋白3/12（3/12）、角蛋白19（K19）免疫细胞化学法对hLSCs进行鉴定。采用逆转录病毒载体介导法，增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP）基因为标记基因，转染培养的hMSCs。将近融合的hLSCs，经47℃高温处理造成热损伤体外模型，再加入带有荧光标记的hMSCs共同培养，荧光显微镜下观察。用角蛋白19（K19）免疫细胞化学法检测共同培养的细胞。结果 HMSCs呈克隆样生长，CD34表达阴性、CD44表达阳性，流式细胞术结果显示hMSCs CD44阳率为92.59%，CD34阳性率为0.01%。HLSCs免疫细胞化学结果显示角蛋白19（K19）表达阳性，角蛋白3/12（K3/12）表达阴性。荧光显微镜下观察EGFP转染成功的hMSCs呈现强绿色荧光。HLSCs经高温损伤后，大多数细胞的细胞间连接消失。共同培养后hMSCs部分细胞表达角蛋白19（K19），并有多核细胞现象。结论 在损伤的微环境下，hMSCs可以向hLSCs转化。在此过程中存在细胞融合现象，细胞融合可能是组织损伤修复的一种方式。
【关键词】 人骨髓间质干细胞 人角膜缘干细胞 共同培养 细胞融合 转化 |
