| 目的 检测syndecan-1在增生性玻璃体视网膜病变（proliferative vitreoretinopathy，PVR）及培养的人视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium，RPE） 细胞的表达及作用。 方法 玻璃体手术中取出的25例PVR患者的增生膜及5例正常人视网膜，应用免疫组织化学方法和免疫荧光法检测syndecan-1的表达；体外培养人RPE细胞，采用逆转录聚合酶链反应（reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR）和免疫荧光法检测正常RPE细胞syndecan-1 mRNA、蛋白的表达；免疫荧光法定性、定量观察不同刺激因子作用下syndecan-1的表达变化，包括：不同浓度（7，35 ng/ml）肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α刺激24 h，不同浓度（1，6 µg/ml）脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）刺激11 h，7 ng/ml TNF-α刺激不同时间（0～24 h，每2 h为一个时间点，共13个），30%THP-1细胞上清刺激3 h、14 h、43 h；2种MAPK通路阻滞剂预处理2 h后对30%THP-1细胞上清作用的干预；30%THP-1细胞上清刺激细胞3 h后0.25%胰酶作用5 min，噻唑蓝（MTT）法检测细胞的粘附力。 结果 syndecan-1 在正常人视网膜RPE层、内外核层表达强阳性，在光感受器内节、内外丛状层、神经节细胞层及神经纤维层表达中度阳性；25例增生膜中，10例表达阳性，其中4例中等阳性，6例弱阳性；在正常RPE细胞可检测到syndecan-1 mRNA和蛋白的表达；未受刺激的RPE细胞胞膜/胞浆、核仁呈现强的黄绿色荧光；随TNF-α、LPS刺激浓度及时间增加，荧光强度呈减弱趋势（p <0.01）；30%THP-1细胞上清刺激后RPE细胞荧光强度明显减弱（p <0.001）。ERK1/2途径抑制剂（PD098059，50 µM）和全MAPK通路抑制剂（SB202474，20，50，100 µM）预处理2 h后可部分阻断30%THP-1细胞上清的下调作用，其中100 µM SB202474阻断率最大，为77.4%。与正常细胞相比，THP-1细胞上清作用3 h后细胞粘附力下降。 结论 与PVR增生膜标本的结果一致，TNF-α和LPS可下调体外培养的人RPE细胞syndecan-1的表达；30%THP-1细胞上清可下调syndecan-1的表达、降低细胞粘附力，且该作用至少部分通过MAPK通路；说明syndecan-1在PVR过程中起一定的作用，本研究为PVR及其它RPE细胞相关眼病的治疗提供了新的思路。 |
