目的: 观察胰岛素在不同浓度、不同作用时间,对体外培养的兔视网膜Müller细胞内谷氨酸(Glutamate)、谷氨酰胺合成酶(GS)、谷氨酰胺(Glutamine)及谷胱甘肽(GSH)变化的影响。
方法: 取幼龄大耳白兔视网膜Müller细胞进行体外培养,第三代细胞用于实验。胰岛素浓度按对照组(0u/ml)、1u/ml、4u/ml、8u/ml、12u/ml分为五组,各浓度组均分别在6h、12h、24h三个时间点进行指标测定。采用生物化学检测方法定量测定Müller细胞内Glutamate、GS 、Glutamine 及GSH的含量变化。
结果: Müller细胞内谷氨酸、谷氨酰胺、谷胱甘肽的含量及谷氨酰胺合成酶的活力在各浓度组、各时间点均低于对照组(p<0.05)。其中,谷氨酸的含量在胰岛素浓度为4u/ml、作用时间为24h时下降最明显(p<0.05),为对照组的2.95% ;谷氨酰胺含量在1u/ml、12h时下降最明显(p<0.05),为对照组的3.99% ; 谷胱甘肽含量和谷氨酰胺合成酶活力在4u/ml、12h时下降最明显(p<0.05),分别为对照组的8.45%、9.84% 。
结论: 本研究结果显示不同浓度胰岛素对体外培养的视网膜Müller细胞内谷氨酸循环及谷胱甘肽均有影响,即降低了Müller细胞摄取谷氨酸并合成谷氨酰胺的功能,同时减少了Müller细胞内谷胱甘肽的合成。 |