目的:研究炎性因子(白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子(TNF-α))作用后,培养人视网膜色素上皮(RPE)细胞的移行,及细胞内钙离子水平([Ca++]i)的变化;及分别联合白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1rA)、染料木黄酮(genistein)、地塞米松作用后上述指标的变化情况。方法:用环钻和棉签制作一个刮伤模型,观察IL-1β和TNF-α及分别联合IL-1rA、genistein和地塞米松作用下,计数hRPE细胞跨过损伤区的细胞数量;用Fluo-3AM负载hRPE细胞,激光共聚焦显微镜检测[Ca++]i。 结果:IL-1β和TNF-α刺激hRPE细胞移行(图1 ),IL-1rA、genistein和地塞米松均可以抑制IL-1β和TNF-α刺激hRPE移行的能力(图2,3,4)。预处理IL-1β和TNF-α后,刮伤区移行的细胞较对照组细胞内Ca++水平升高,RPE细胞内荧光强度升高约204%(图5,6,7,8); 加入100μg•L-1IL-1rA作用于hRPE,细胞内荧光迅速减弱,至接近基线水平(图9)。100μMgenistein作用后,细胞内荧光迅速减弱,至接近基线水平(图10)。10mg•L-1地塞米松作用后,细胞内荧光减弱,约为对照组的23%(图11)。 结论:炎性因子刺激hRPE细胞移行,并刺激[Ca++]i 水平升高;IL-1rA、genistein和地塞米松可以抑制炎性因子刺激的hRPE细胞移行及[Ca++]i 水平。
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